Нуклеазгүй усыг сонгох гарын авлага Эдгээр нь II төрлийн 18 мегаом шүүлтүүртэй (хамгийн сүүлийн үеийн урвуу осмос шүүлтүүр ба ионгүйжүүлэлтээр), дараа нь автоклавт болон ариутгасан шүүлтүүртэй.
Нуклеазгүй ус юу хийдэг вэ?
ДНХ болон РНХ-ийн дээж алдагдахаас сэргийлэхийн тулд өндөр цэвэр, нуклеазгүй усыг ПГУ, cDNA синтез, нуклейн хүчлийг цэвэршүүлэх, дараалал тогтоох зэрэг хэрэглээнд ашиглах нь чухал., ба клонжуулалт. … Идэвхтэй нуклеазыг арилгах аргад шүүж, диэтилпирокарбонатаар (DEPC) эмчлэх арга орно.
Нуклеазгүй ус хэт цэвэр үү?
Нуклеазгүй ус нь ДНХ болон РНХ-ийн аль алинд нь агуулагддаггүй бөгөөд DEPC (диэтилпирокарбонат)-аар эмчлэх ба/эсвэл РНХ болон ДНХ-г идэвхгүйжүүлэхийн тулд автоклавт оруулдаг. Харин хэт цэвэр усыг хэт шүүлтүүрээр гаргаж авч өндөр цэвэршилттэй болгодог. Мөн ямар ч нуклеаз агуулаагүй.
Та нуклеазгүй ус хийж чадах уу?
Бүх хариулт (10) MilliQ эсвэл давхар нэрмэл усанд 0.1% DEPC нэмээд 37 хэмд шөнө байлгаад автоклавт хийнэ. Хэрэглэсэн шилэн савыг мөн адил усаар зайлж эсвэл хлороформоор боловсруулсан эсвэл халуун зууханд (260 градус) 4 цагийн турш жигнэх хэрэгтэй. Энэ нь хэрэглэхэд бэлэн байх ёстой - DNase болон RNase free
Нуклеазгүй ус ба RNaseгүй ус хоёрын ялгаа юу вэ?
Нуклеазгүй ус нь нуклеазгүй гэсэн үг. DNase нь ихэвчлэн тогтворгүй байдаг. Үүнийг эргүүлэх эсвэл халаах замаар идэвхгүй болгож болох боловч RNase нь илүү тогтвортой байдаг. RT тохиолдолд та RNase агуулаагүй ус эсвэл нуклеазгүй ус хэрэглэнэ.
