Logo mn.boatexistence.com

Хлоропластыг буферээс салгах хамгийн сайн арга юу вэ?

Агуулгын хүснэгт:

Хлоропластыг буферээс салгах хамгийн сайн арга юу вэ?
Хлоропластыг буферээс салгах хамгийн сайн арга юу вэ?

Видео: Хлоропластыг буферээс салгах хамгийн сайн арга юу вэ?

Видео: Хлоропластыг буферээс салгах хамгийн сайн арга юу вэ?
Видео: Хлоропласт бэлтгэх арга 2024, May
Anonim

Пигментийг гаргаж авахын тулд хлоропластуудыг тусгаарлах буферт түдгэлзүүлсэн байна. Хлоропластуудаас пигментүүдийг гаргаж авахын тулд эхлээд буферээс салах хэрэгтэй. Хлоропластыг буферээс салгах хамгийн сайн арга юу вэ? центрифуг ашиглан

Хлоропластыг яаж тусгаарлах вэ?

Хлоропласт тусгаарлах аргад эсийн ханыг холигч эсвэл нэгэн төрлийн нэгэн төрлийн болгогч ашиглан механик аргаар хугалдаг. Дараа нь эвдэрсэн навчны эд, эсийн хог хаягдлыг шүүж зайлуулна. Хлоропластыг перколл градиент ашиглан центрифугийн аргаар цуглуулдаг.

Хлоропласт тусгаарлах буферийг яаж хийх вэ?

2X буферийн нөөцийг 1:1 харьцаагаар dH2O усаар шингэлж 1X хлоропласт тусгаарлах буферийг шаардлагатай хэмжээгээр бэлтгэнэ 1X хлоропластын мл тутамд 10 мкл 10% BSA уусмал нэмнэ. Тусгаарлах буфер. Хэрэглэхийн өмнөхөн 1 мл хлоропласт тусгаарлах буфер тутамд 1 мкл DTT нэмнэ. Энэ буферийг "Бүрэн буфер" гэж шошго.

Хлоропласт тусгаарлах буферт юу байдаг вэ?

ДНХ-ийн тусгаарлах буфер нь 100 мМ NaCl, 100 мм Tris-HCl (рН 8.0), 50 мм EDTA, 1 мм DTT -аас бүрдсэн хлоропласт лизийг шавраар гаргаж авсан. хлоропласт үрэлийг 8 мл ДНХ тусгаарлах буфер, 1.5 мл 20% SDS, 20 мкл 2-Меркаптоэтанол, 30 мкл протеиназа К (10 мг/мл) бүхий центрифугийн хоолойд 55°С-т 4 цагийн турш хийнэ.

Хлоропласт тусгаарлах протоколд бууцайны навчийг нэгэн төрлийн болгоход ашигладаг буферийн рН гэж юу вэ?

Бууцай нь сайн хлоропластаар баялаг бөгөөд амархан тусгаарлагддаг. Та навчийг хагарахгүйн тулд 0.1 М фосфатын буфер, рН 7.5, 0.5 М сахароз бүхий хүйтэн хутгагчинд хийнэ.

Зөвлөмж болгож буй: